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微生物實驗室必知培養基制備技術匯總!

發布時間: 2021-05-26  點擊次數: 137次
  微生物實驗室必知培養基制備技術匯總!
  一、玻璃器皿的清洗
  在制備培養基的過程中,首先要使用一些玻璃器皿,如試管、三角瓶、培養皿、燒杯和吸管等。這些器皿在使用前都要根據不同的情況,經過一定的處理,洗刷干凈。有的還要進行包裝,經過滅菌等準備就緒后,才能使用。
  1、新購的玻璃器皿
  除去包裝沾染的污垢后,先用熱肥皂水刷洗,流水沖凈,再浸泡于1~2%的工業鹽酸中數小時,使游離的堿性物質除去,再以流水沖凈。對容量較大的器皿,如大燒瓶、量筒等,洗凈后注入濃鹽酸少許,轉動容器使其內部表面均沾有鹽酸,數分鐘后傾去鹽酸,再以流水沖凈,倒置于洗滌架上將水空干,即可使用。
  2、用過的玻璃器皿
  凡確無病原菌或未被帶菌物污染的器皿,使用后可隨時沖洗,吸取過化學試劑的吸管,可先浸泡于清水中,待到一定數量后再集中進行清洗。有可能被病原菌污染的器皿,必須經過適當消毒后,將污垢除去,用皂液洗刷,再用流水沖洗干凈。若用皂液未能洗凈的器皿,可用洗液浸泡適當時間后再用清水洗凈。洗液的主要成份是重鉻酸鉀和濃流酸,其作用是將有機物氧化成可溶性物質,以便沖洗。洗液有很強的腐蝕作用,使用時應特別小心,避免濺到衣服、身體和其他物品上。
  二、培養基的類型
  在實驗室中配制的適合微生物生長繁殖或累積代謝產物的任何營養基質,都叫做培養基(Media)。由于各類微生物對營養的要求不同,培養目的和檢測需要不同,因而培養基的種類很多。我們可根據某種標準,將種類繁多的培養基劃分為若干類型。
  1、根據對培養基組成物質的化學成分是否完全了解來區分,可以將培養基分為天然培養基、合成培養基和半合成培養基。
 ?。保┨烊慌囵B基 天然培養基是指利用各種動、植物或微生物的原料,其成分難以確切知道。用作這種培養基的主要原料有:牛肉膏、麥芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、麩皮、各種餅粉、馬鈴薯、牛奶、血清等。用這些物質配成的培養基雖然不能確切知道它的化學成分,但一般來講,營養是比較豐富的,微生物生長旺盛,而且來源廣泛,配制方便,所以較為常用,尤其適合于配制實驗室常用的培養基。這種培養基的穩定性常受生產廠或批號等因素的影響。
 ?。玻┖铣膳囵B基 合成培養基是一類化學成分和數量完全知道的培養基,它是用已知化學成分的化學藥品配制而成。這類培養基化學成分精確、重復性強,但價格昂貴,而微生物又生長緩慢,所以它只適用于做一些科學研究,例如營養、代謝的研究。
 ?。常┌牒铣膳囵B基 在合成培養基中,加入某種或幾種天然成分;或者在天然培養基中,加入一種或幾種已知成分的化學藥品即成半合成培養基。例如馬鈴薯蔗糖培養基等。這種培養基在生產實踐和實驗室中使用最多。
 ?。?、根據培養基的物理狀態來區分,可以分為固體培養基、液體培養基和半固體培養基。
 ?。保┮后w培養基 所配制的培養基是液態的,其中的成分基本上溶于水,沒有明顯的固形物,液體培養基營養成分分布均勻,易于控制微生物的生長代謝狀態。
 ?。玻┕腆w培養基 在液體培養基中加入適量的凝固劑即成固體培養基。常用作凝固劑的物質有瓊脂、明膠、硅膠等,以瓊脂最為常用。固體培養基在實際中用得十分廣泛。在實驗室中,它被用作微生物的分離、鑒定、檢驗雜菌、計數、保藏、生物測定等。
 ?。常┌牍腆w培養基 如果把少量的凝固劑加入到液體培養基中,就制成了半固體培養基。以瓊脂為例,它的用量在0.2~1%之間。這種培養基有時可用來觀察微生物的動力,有時用來保藏菌種。
 ?。?、根據培養基的用途來區分,可分為選擇培養基、增殖培養基、鑒別培養基等。
 ?。保┻x擇培養基 在培養基中加入某種物質以殺死或抑制不需要的菌種生長的培養基,稱之為選擇培養基。如鏈霉素、氯霉素等抑制原核微生物的生長;而制霉菌素、灰黃霉素等能抑制真核微生物的生長;結晶紫能抑制革蘭氏陽性細菌的生長等。
 ?。玻┰鲋撑囵B基 在自然界中,不同種的微生物常生活在一起,為了分離我們所需要的微生物,在普通培養基中加入一些某種微生物特別喜歡的營養物質,以增加這種微生物的繁殖速度,逐漸淘汰其它微生物,這種培養基稱為增殖培養基,這種培養基常用于菌種篩選和選擇增菌中。在某種程度上講,增殖培養基也是一種選擇培養基。
 ?。常╄b別培養基 在培養基中加入某種試劑或化學藥品,使難以區分的微生物經培養后呈現出明顯差別,因而有助開快速鑒別某種微生物。這樣的培養基稱之為鑒別培養基。例如用以檢查飲水和乳品中是否含有腸道致病菌的伊紅美藍培養基就是一種常用的鑒別性培養基。
  有些培養基是具有選擇和鑒別雙重作用。例如食品檢驗中常用的麥康凱培養基是一例。它含有膽鹽、乳糖和中性紅。膽鹽具有抑制腸道菌以外的細菌的作用(選擇性),乳糖和中性紅(指示劑)能幫助區別乳糖發酵腸道菌(如大腸桿菌)和不能發酵乳糖的腸道致病菌(如沙門氏菌和志賀氏菌)。
  另外,根據培養基的營養成分是否“完全”,可以分為基本培養基、完全培養基和補充培養基,這類術語主要是用在微生物遺傳學中。根據培養基用于生產的目的來區分,可以分為種子培養基和發酵培養基。還有專門用于培養病毒等寄生微生物的活組織培養基,如雞胚等;專門用于培養自養微生物的無機鹽培養基等。

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